293E (人胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾))

商品屬性

商品介紹

別稱(chēng) 293 c18; 293c18; HEK 293 c18; HEK-293 c18; HEK293-EBNA1; HEK-293-EBNA; HEK 293-EBNA; HEK 293 EBNA; HEK293EBNA; 293 EBNA; 293-EBNA1; 293-EBNA; 293/EBNA; 293EBNA; EBNA-293; EBNA293; 293E; HEK293E; HEK/EBNA; HEK-EBNA; HEK.EBNA; 293/EBNA-1

年齡（性別） 胚胎

組織來(lái)源 腎??

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 IMDM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠線(xiàn)粒體乙脫氫酶(ALDM)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ALDM ELISA Kit

Pla vitamin D (VD) ELISA Kit 植物(VD)檢測(cè)試劑盒

MouseEndostatin,ESELISAKit 小鼠內(nèi)皮抑素(ES)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanAmylinELISAKit人胰淀素

細(xì)胞HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitER大鼠雌二醇受體

IL1R1重組小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

酸激酶(PK)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)

GCSH重組人 GCSH 蛋白 Protein

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

CD200 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200 蛋白

酸激酶(PK)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白

IL1R1重組小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD200 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200 蛋白

GCSH重組人 GCSH 蛋白 Protein

293E (人胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾))小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) ELISA Kit 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)檢測(cè)試劑盒

Humankeratansulfate,KSELISAKit 人硫酸角質(zhì)素(KS)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Camelansforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2檢測(cè)試劑盒轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

玉米葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5次

Mouseinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血小板反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒   小鼠血小板反應(yīng)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠血小板反應(yīng)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血小板反應(yīng)蛋白試劑盒、小鼠血小板反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠血紅素氧合酶檢測(cè)試劑盒   小鼠血紅素氧合酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠血紅素氧合酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血紅素氧合酶試劑盒、小鼠血紅素氧合酶檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠血管性血友病因子檢測(cè)試劑盒   小鼠血管性血友病因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠血管性血友病因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管性血友病因子試劑盒、小鼠血管性血友病因子檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠胰島素原檢測(cè)試劑盒   小鼠胰島素原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠胰島素原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠胰島素原試劑盒、小鼠胰島素原檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。